蛋白分子量測定

分子量是有機化合物基本的理化性質(zhì)參數(shù)。分子量正確與否往往代表著所測定的有機化合物及生物大分子的結構正確與否。分子量也是多肽、蛋白質(zhì)等鑒定中首要的參數(shù)，也是基因工程產(chǎn)品報批的重要數(shù)據(jù)之一。
基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時間質(zhì)譜(maldi-tof-ms)是近年來發(fā)展起來的一種新型的軟電離生物質(zhì)譜，具有樣品消耗量少、靈敏度高、測定速度快、易于實現(xiàn)高通量、可對蛋白進行大規(guī)模的鑒定及生物大分子的分子量測定等特點，為蛋白質(zhì)研究提供了一種強有力的分析測試手段。簡便，直觀，可直接對大分子混合物進行測定，并且基本不產(chǎn)生碎片峰是maldi-tof-ms的優(yōu)勢，因此這項技術在生物大分子分子量測定中得到廣泛應用。maldi-tof-ms儀器主要由兩部分組成：基質(zhì)附助激光解吸電離離子源（maldi）和飛行時間質(zhì)量分析器（tof）。maldi的原理是用激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結晶薄膜，基質(zhì)從激光中吸收能量傳遞給生物分子，而使生物分子電離的過程。它是一種軟電離技術，適用于混合物及生物大分子的測定。tof的原理是離子在電場作用下加速飛過飛行管道，根據(jù)到達檢測器的飛行時間不同而被檢測即測定離子的質(zhì)荷比（m/z）與離子的飛行時間成正比，從而實現(xiàn)對離子的檢測。maldi-tof的準確度高達0.1%-0.01%，遠遠高于目前常規(guī)應用的sds電泳與高效凝膠色譜技術，目前可測定生物大分子的分子量范圍為700-600000da。
百泰派克公司采用bruker公司的ultraflextreme™ maldi tof/tof質(zhì)譜系統(tǒng)，為廣大科研工作者提供生物分子分子量測定服務，用于分析目標蛋白或多肽的分子量，檢測蛋白二聚體，以及對樣品純度進行大體評估。
樣品要求
1. 樣品的需要量約為10-50ug；
2. 樣品純度>90%；
3. 樣品準備過程中盡量避免表面活性劑，例如sds、triton-x等的使用；鹽濃度，例如tris等也盡量降低；
4. 如果您在準備樣品的過程中必須要用到表面活性劑以及較高的鹽濃度，我們收到您的樣品后會首先通過相關實驗對上述化合物進行去除，然后進行后續(xù)的分子量測定。
注意
膠粒樣品或者轉(zhuǎn)移到pvdf膜上的樣品不適合于分子量測定實驗。
研究案例
在 maldi-tof 的應用過程中，除了可以檢測樣品的分子量，還能提供樣品本身純度的信息。如下圖所示，樣品在理論分子量 1046.6da范圍出現(xiàn)明顯的信號峰，且樣品純度較好。
分子量測定研究案例
分子量測定研究案例
中/英文項目報告
在技術報告中，百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括：
1. 實驗步驟（中英文）
2. 相關的質(zhì)譜參數(shù)（中英文）
3. 質(zhì)譜圖片
4. 原始數(shù)據(jù)
5. 蛋白質(zhì)分子量和純度分析結果