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厭氧培養(yǎng)箱的注意事項

厭氧培養(yǎng)箱的注意事項
1. 儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;2. 開機前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明,掌握正確使用方法;3. 培養(yǎng)物放入是在操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境后放入;4. 如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持10小時厭氧狀態(tài)(過10小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理);5. 經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象;6. 調(diào)換氣瓶時,注意要扎緊氣管,避免流入含氧氣體;真空泵按要求使用,定期檢查加油。一、操作室厭氧環(huán)境形成1 按使用要求放置好必要的配件和器具,并向操作室內(nèi)放入二個塑料袋。2 通電源開照明燈,開控溫儀,調(diào)節(jié)所需溫度及安全溫度。3 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑,并放入美蘭指示劑(封閉)。4 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門,并抽真空校驗。5 操作室內(nèi)次置換(氮氣置換):(1)先用橡皮管插入操作室內(nèi)進氣口,另一頭插入塑料袋。(2)接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥,使二只塑料袋充足氮氣,然后扎緊袋口。(3)把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊。(4)把塑料袋內(nèi)氮氣漸漸地放于操作室內(nèi),至全部放出。6 操作室d二次置換(氮氣置換)重復(fù)一 次充氮過程,并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。7 操作室d三次置換(混合氣體置換):(混合氣體配比為:n2↑ 85% h2 ↑ 10% co2↑ 5%)(1)調(diào)換氣路打開混合氣道通閥門進氣,充氣時要隨時腳踏開關(guān)開閉排氣。(2)混合氣充滿塑料袋后,關(guān)掉混合氣直通閥(三通閥),使混合氣經(jīng)過流量計輸入操作并調(diào)整流量計,流量為每分鐘10毫升左右。(3)把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi)。(4)通過三次換氣后,操作室內(nèi)氣體含氧量已處于微量狀態(tài)。8 操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進行催化除氧,一 小時后打開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變況,不變色為操作室內(nèi)達到厭氧環(huán)境。9 開紫外線燈,室內(nèi)進行處理。時間自定。二、菌種的置入和培養(yǎng)1 檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之。2 打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門。3 取樣室充氮置換三次過程:先抽真空度500毫米柱(66kpa)以上停,然后人工打開氮氣閥門進氣,使指針回復(fù)零位后進行下次操作。4 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)。5 取樣室內(nèi)外門開啟,關(guān)緊要抽低真空度100毫米柱(13 kpa)檢驗及幫助操作。6 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件:(1)每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察,正常情況下使用。如不正常就重新?lián)Q氣。(2)要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補進的氫氣能和微量的氧結(jié)合通過催化吸收,保了室內(nèi)厭氧狀態(tài),補入混合氣選定為每分鐘10毫升左右。(3)連續(xù)培養(yǎng)運行一 天,換一 次除氧劑和干燥劑。7 接種棒器的應(yīng)用:(1)隨時用鎳鉻電熱絲使電短路而變赤熱以進行(接種棒)(2)熔蠟處可直接放上,試管封蠟口旋轉(zhuǎn)熔蠟。8 操作室里的培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度可任意選擇和控制。9 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力為0.1mpa左右。
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