武漢思特進(多圖)-熒光原位雜交
惰性多聚體可用來促進250個堿基以上的探針的雜交率。對單鏈探針可增加3倍,熒光原位雜交,而對雙鏈探針、隨機剪切或隨機引物標記的探針可增加高達100倍。而短探針不需用促進劑,因其復雜度低和分子量小 ,短探針本身的雜交率就高 。*葡聚糖是一種廣泛用于較長雙鏈探針雜交的促進劑。這是一種多聚胺,平均分子量為500 000。另一種常見的促進劑是聚乙二醇(peg),peg分子量?。?000~8000)、粘度低、價格低廉,但它不能完成取代*葡聚糖。在某些條件下5%~10%*葡聚糖效果較好,若用5%~10%peg則可產生很高的本底。因此,使用促進劑時有必要優化條件。
原位雜交試驗
收集斑馬魚的胚胎,在holfretor水中培養,到達所需要的發育時期時,用蛋白酶去除卵膜,用4%*固定,在4℃保存,二十四小時后用50%甲6醇2%*溶液洗,然后換成甲9醇,在-20c 保存,待用(兩天和兩天以上的胚胎需要用雙氧6水處理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培養,可阻斷色素的形成)
原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交,從而對特定核酸順序進行精0準確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行。
原位雜交(in situ hybridization)將標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交,稱為原位雜交。
使用dna或者rna探針來檢測與其互補的另一條鏈在*或其他真核細胞中的位置。
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